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必威体育首页比如当时我需要拿到三个复合物用来结晶,一个一个多慢啊,干脆就并行着来:每种复合物养8升E。coli,一共24升,需要俩摇床。为了能够不让离心机、FPLC等仪器成为限速步,我就跟实验室其他人打时间差,可以两台以上的仪器同时用。从收菌到affinitycolumn(亲和层析)、ionexchange(离子交换柱)、limitedproteolysis(限制性蛋白酶切)、gelfiltration(分子筛),别看听起来很复杂,但那时候已经可以做到不用多想都能每一步完美衔接,完成所有这些也不过就是12个小时左右,还能在等实验的间隙吃个饭。好了高质量的蛋白拿到,冻起一批,再拿一部分新鲜出锅的直接开始结晶实验。印象里是27个24孔板(tray),每个孔3个液滴,我那时候的手速大概是每小时4个tray。差不多8个小时,完成结晶。这样,大概连轴转一整天24个小时,同时安排做好下一批实验的筹备工作,然后毫无心理负担地回去睡上十几个小时。

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